DB13/T1106-2009液體乳中青霉噻唑酸鉀的測定高效液相色譜法內容是什么?百檢網檢測范圍廣泛，可根據客戶需求選擇合適的檢測標準及項目安排檢測，全國近千家合作實驗室，CMA/CNAS資質齊全，可就近安排寄樣檢測。今天百檢網就給大家簡單介紹一下DB13/T1106-2009液體乳中青霉噻唑酸鉀的測定高效液相色譜法標準內容。

1 范圍

本標準規定了液體乳中青霉噻唑酸鉀的高效液相色譜測定方法。

本標準適用于液體乳中青霉噻唑酸鉀的測定。

本標準的方法檢出限：10.0μg/kg。

2 規范性引用文件

下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內容)或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據本標準達成協議的各方研究是否使用這些文件的*新版本。凡是不注日期的引用文件，其*新版本適用于本標準。

GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方法

3 原理

試樣中的青霉噻唑酸鉀在去除蛋白、脂肪處理后，經高效液相色譜分離，紫外檢測器檢測，外標法定性定量。

4 試劑和材料

除另有說明外，所用試劑均為分析純，水為GB/T 6682 規定的一級水。

4.1 甲醇：色譜純

4.2 磷酸二氫鈉。

4.3 磷酸二氫鈉溶液(pH=4.5)：

4.4 無水乙醇。

4.5 青霉素V鉀標準品：純度≥99‰。

4.6 青霉噻唑酸鉀標準儲備液(1mg加L)：準確稱取0.1000g青霉素Ⅴ鉀置于100mL容量瓶中，加入1mL青霉素酶，室溫放置2h后用水定容，搖勻備用。

4.7 青霉素噻唑酸鉀標準冮工作溶液：根據需要吸取適量青霉噻唑酸鉀標準儲備液，用空白樣品稀釋成適當濃度的基質混合標準工作溶液。

5 儀器

5.1 高效液相色譜儀：配有紫外檢測器(UV)。

5.2 分析天平：感量0.1mg和0.01g各一臺。

5.3 低溫高速離心機。

5.4 水相微孔濾膜：0.45μm。

6 測定步驟

6.1 試樣溶液的制備

準確稱取25g(*到0.01g)牛乳于50mL離心管中，4000r/min低溫(4℃)離心10min；去除上層脂肪層；再加入25mL無水乙醇，20000rmin低溫(4℃)離心10min，取上清液定容至50mL，經0.45μm微孔濾膜過濾，待高效液相色譜分析。

6.2 液相色譜條件

檢測波長：230nm。

色譜柱：ODS C 18 5μm，250mm×2.1mm或相當者。

流動相：磷酸二氫鈉溶液：甲醇=50：50。

流速：1mL/min。

柱溫：30℃。

進樣量：20μL。

6.3 測定

用青霉噻唑酸鉀標準儲備溶液配成的基質標準溶液分別進樣，以標準工作溶液濃度為橫坐標，以峰面積為縱坐標，繪制標準工作曲線。用標準工作曲線對樣品進行定量，樣品溶液中青霉噻唑酸鉀的響應值均應在儀器測定的線性范圍內。

7 結果計算

從標準工作曲線上得到試樣中相應的青霉噻唑酸鉀濃度后，結果按公式(1)計算：

式中：

X——試樣中被測組分殘留量，單位為微克每千克(μg/kg)。

C——從標準工作曲線得到的試樣溶液中被測組分的濃度，單位為納克每毫升(ng/mL)。

V——試樣溶液定容體積，單位為毫升(mL)。

m——試樣質量，單位為克(g)。

F——稀釋倍數。

8 精密度

在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的*差值不得超過算術平均值的10%。

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