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檢測知識
NY/T 1757-2009 飼料中苯駢二氮雜革類藥物的測定 液相色譜-串聯質譜法 標準內容
日期:2023-01-05 10:59:08作者:百檢網 人氣:0

NY/T1757-2009飼料中苯駢二氮雜革類藥物的測定液相色譜-串聯質譜法內容是什么?百檢網檢測范圍廣泛,可根據客戶需求選擇合適的檢測標準及項目安排檢測,全國近千家合作實驗室,CMA/CNAS資質齊全,可就近安排寄樣檢測。今天百檢網就給大家簡單介紹一下NY/T1757-2009飼料中苯駢二氮雜革類藥物的測定液相色譜-串聯質譜法標準內容。

1 范圍

本標準規定了測定飼料中氯氮革、硝西泮、奧沙西泮、氯硝西泮、勞拉西泮、艾司唑侖、阿普唑侖、三唑侖和地西泮等9種苯駢二氮雜革類藥物含量的液相色譜串聯質譜法(LCMS/MS)。

本標準適用于配合飼料、濃縮飼料和添加劑預混合飼料。

LC-MS/MS法定量限為0.03mg/kg。

2 規范性引用文件

下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內容)或修訂版均不適用于本標準,然而,鼓勵根據本標準達成協議的各方研究是否可使用這些文件的*新版本。凡是不注日期的引用文件,其*新版本適用于本標準。

GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方法

GB/T 14699.1 飼料采樣

GB/T 20195 動物飼料試樣的制備

3 原理

在堿性條件下,用乙酸乙酯提取飼料中苯駢二氮雜革類藥物,蒸干提取液用正已烷溶解殘渣,經過硅酸鎂固相萃取小柱富集、凈化,LC-MS/MS分離測定。

4 試劑和材料

除非另有規定,僅使用確認為分析純的試劑。

4.1 水,GB/T 6682,一級和三級。

4.2 甲醇:色譜純。

4.3 乙腈:色譜純。

4.4 甲酸:優級純。

4.5 正己烷。

4.6 氯化鈉。

4.7 乙酸乙酯。

4.8 碳酸鈉飽和溶液:稱取56g碳酸鈉,加入100mL水(三級,4.1),攪拌、配制成飽和溶液。

4.9 0.05%甲酸溶液:準確移取5.00mL甲酸(4.4)于100mL容量瓶中,用水(一級)定容,用0.20μm膜過濾后,再準確移取10.00mL于1000mnL容量瓶中,用水(一級)定容、搖勻。用前超聲5min。

4.10 洗脫液I:甲醇(4.2)+正已烷(4.5)+丙酮=45+45+10。

4.11 洗脫液Ⅱ:甲醇十水(一級)=70+30。

4.12 苯駢二氮雜革類藥物混合貯備溶液(100μg/mL):分別準確稱取9種苯駢二氮雜革類藥物(氯氮革、硝西泮、奧沙西泮、氯硝西泮、勞拉西泮、艾司唑侖、阿普唑侖、三唑侖和地西泮)化學對照品(各種藥物的純度以100%計)100mg(*到0.1mg)于100nL容量瓶中,用甲醇溶解、定容,配制成濃度各為

100μg/mL 的苯駢二氮雜革類藥物混合貯備溶液。置于4℃~8℃冰箱中保存,有效期為1個月。

4.13 苯駢二氮雜革類藥物中間溶液(1.00μg/mL):準確移取苯駢二氮雜革類藥物混合貯備溶液(4.12)l00mL于100mL容量瓶中,用甲醇稀釋、定容。置于4℃~8℃冰箱中保存,有效期為1周。

4.14 苯駢二氮雜革類藥物工作溶液:分別準確移取苯駢二氮雜革類藥物中間溶液(4.13)50μL、100μL、200μL、300μL、500μL、750μL,用洗脫液Ⅱ(4.11)稀釋至lmL配制成工作溶液,濃度分別為0.05ug/ml、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.30μg/mL、0.50μg/mL、0.75μg/mL?,F用現配。

4.15 硅酸鎂固相萃取小柱:500mg/6mL。

5 儀器

5.1 實驗室用樣品粉碎機。

5.2 分析天平:感量0.1mg。

5.3 帶蓋塑料離心管:100mL。

5.4 漩渦混合器。

5.5 離心機。

5.6 旋轉蒸發儀:配備150mL雞心瓶。

5.7 氮吹儀。

5.8 固相萃取裝置。

5.9 超聲波清洗器。

5.10 液相色譜-串聯質譜儀:配備電噴霧離子源。

6 采樣

6.1 采樣步驟:按GB/T 14699.1 的規定執行。

6.2 試樣的制備:按GB/T 20195 的規定制備試樣,全部通過0.45mm孔徑的篩,混勻,裝入密閉容器中避光保存備用。

7 分析步驟

7.1 提取

稱取約5g試樣(*到0.1mg)于離心管(5.3)中,加入2g氯化鈉(4.6),加入20mL三級水,用碳酸鈉飽和溶液(4.8)調pH至9~10。加人30ml。乙酸乙酯(4.7),加蓋密封,漩渦(5.4)混勻1min,置離心機(5.6)4 360g離心5min,吸取上消液于150mL雞心瓶(5.6)中。再加入30mL乙酸乙酯,重復上述操作,合并2次提取液。

7.2 凈化

將提取液在60℃的旋轉蒸發儀上蒸至近干,用5nL正己烷溶解殘渣,加載到已用5mL正乙烷活化的硅酸鎂固相萃取小柱(4.15),液體的過柱速度不要超過lmL/min;用3mL正己烷清洗雞心瓶,清洗液也加載到硅酸鎂固相萃取小柱中;用5mL洗脫液Ⅰ(4.10)洗脫,收集洗脫液于10mL具塞試管中,在40℃水浴中用氮氣(5.7)吹干;再準確移取3.00mL洗脫液∏洗脫,加壓吹干硅酸鎂固相萃取小柱,收集洗脫液于同一具塞試管中,溶解殘渣,漩渦混勻,過0.20μm有機濾膜,上機測定。如果上機溶液中各藥物的濃度不在工作溶液范圍內,用洗脫液Ⅱ進行調整。

7.3 測定

7.3.1 液相色譜測定參數的設定

色譜柱:C18柱,柱長100mm,內徑3.0mm,粒度1.8μm或性能類似的分析柱。

…………

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