在做檢測時,有不少關(guān)于“測定藥物的最低抑菌濃度常采用什么方法”的問題,這里百檢網(wǎng)給大家簡單解答一下這個問題。

測定藥物的最低抑菌濃度的常用方法包括：肉湯稀釋法、瓊脂稀釋法和微量稀釋法等。

一、肉湯稀釋法

肉湯稀釋法是一種通過逐步在營養(yǎng)肉湯中加入微生物樣本并逐級稀釋，以測定微生物在特定條件下的生長抑制濃度的方法。其原理基于微生物在適宜培養(yǎng)基中的生長繁殖能力，通過稀釋降低微生物濃度，直至找到不引起可見生長的最低藥物濃度。優(yōu)點(diǎn)是操作簡便，適合大規(guī)模初步篩選；缺點(diǎn)在于無法精確計數(shù)，且結(jié)果易受培養(yǎng)基成分影響，對于低濃度抑制效果不敏感。該方法的操作步驟如下：

1、制備藥物溶液：將藥物溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，通常為生理鹽水或蒸餾水，以制備一定濃度的藥物溶液。

2、制備菌液：將待測細(xì)菌培養(yǎng)至對數(shù)生長期，然后調(diào)整菌液濃度至一定標(biāo)準(zhǔn)，如0.5 McFarland標(biāo)準(zhǔn)。

3、藥物稀釋：將藥物溶液進(jìn)行連續(xù)稀釋，形成一系列不同濃度的稀釋液。

4、混合菌液和藥物：將調(diào)整好的菌液與不同濃度的藥物稀釋液混合，通常在96孔板中進(jìn)行。

5、培養(yǎng)和觀察：將混合后的菌液在適宜的溫度下培養(yǎng)一定時間，然后觀察菌液的生長情況，以確定最低抑菌濃度。

二、瓊脂稀釋法

瓊脂稀釋法利用含有不同濃度抗菌藥物的瓊脂平板，將微生物樣本均勻涂布其上，通過觀察微生物生長形成的菌落形態(tài)及數(shù)量，評估藥物的抑菌效果。該方法能直觀展示藥物對微生物的抑制作用，且可同時進(jìn)行多濃度測試。優(yōu)點(diǎn)是結(jié)果直觀、可重復(fù)性好；缺點(diǎn)是操作相對繁瑣，耗時較長，且對于低生長速率的微生物檢測可能不夠靈敏。該方法的操作步驟如下：

1、制備藥物溶液：與肉湯稀釋法相同，首先制備一定濃度的藥物溶液。

2、制備瓊脂培養(yǎng)基：將瓊脂與營養(yǎng)培養(yǎng)基混合，加熱至瓊脂完全溶解，然后冷卻至適宜溫度。

3、藥物稀釋：將藥物溶液加入到瓊脂培養(yǎng)基中，形成一系列不同濃度的瓊脂培養(yǎng)基。

4、倒板：將不同濃度的瓊脂培養(yǎng)基倒入平板中，待其凝固。

5、接種和培養(yǎng)：在凝固后的瓊脂平板上接種待測菌液，然后在適宜的溫度下培養(yǎng)一定時間。

6、觀察和測定：觀察平板上的生長情況，以確定最低抑菌濃度。

三、微量稀釋法

微量稀釋法是在微量孔板（如96孔板）中，通過精密儀器自動或手工分配固定體積的抗菌藥物和微生物懸液，實現(xiàn)高效、精確的濃度梯度稀釋。其優(yōu)勢在于能準(zhǔn)確測定最低抑菌濃度（MIC），所需樣品和試劑量少，自動化程度高，適合大規(guī)模藥物敏感性測試。該方法對設(shè)備和操作精度要求較高，成本相對較大，且對于某些特殊微生物或復(fù)雜樣本的處理可能存在局限性。該方法的操作步驟如下：

1、制備藥物溶液：與肉湯稀釋法相同，首先制備一定濃度的藥物溶液。

2、微量稀釋：將藥物溶液進(jìn)行微量稀釋，形成一系列不同濃度的稀釋液。

3、混合菌液和藥物：將微量稀釋后的藥物稀釋液與待測菌液混合，通常在96孔板中進(jìn)行。

4、培養(yǎng)和觀察：將混合后的菌液在適宜的溫度下培養(yǎng)一定時間，然后觀察菌液的生長情況，以確定最低抑菌濃度。